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凯氏定氮法测定蛋白质含量

时间:2023-06-11 16:54:32

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定氮法测定蛋白质的原理?

定氮法通过将样品中的蛋白质完全燃烧后,利用盐酸或硫酸将产生的氨气转化成氨盐,并将氨盐滴入酸溶解的指示剂中,根据溶液的颜色变化测定其中的氨盐含量,从而计算出样品中的蛋白质含量。 此外,定氮法还可以通过控制试剂和反应条件来消除非蛋白质物质的干扰,从而提高测定的精度和准确性。 对于分析蛋白质含量非常关键的生物领域而言,定氮法是一种基本且可靠的分析方法。

定氮法测定蛋白质的原理?

定氮法测定蛋白质的是通过测出样品中的总含氮量再乘以相应的蛋白质系数而求出蛋白质的含量,此法的结果称为粗蛋白质含量。 原理:有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵。硫酸铵与强碱反应,放出氨。将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定。根据测得的氨量,计算样品的总氮量。、试剂与材料:浓硫酸、硫酸钾-硫酸铜粉末(称取80g硫酸钾和20g硫酸铜(五水),0.3g二氧化硒研细混合)、30%氢氧化钠溶液、2%硼酸溶液、0.01M标准盐酸、混合指示剂(田氏指示剂)储存液(取50ml0.1%甲烯蓝乙醇溶液与200ml0.1%甲基红溶液混合,储存于棕色瓶中备用。 克氏定氮法 :天然含氮有机化合物(如蛋白质)与浓硫酸共热时分解出氨,氨与硫酸反应生成硫酸铵。在克氏定氮仪中加入强碱碱化消化液,使硫酸铵分解出氨。用水蒸气蒸馏法将氨蒸入硼酸溶液中,然后再用标准稀硫酸酸溶液进行滴定,滴定所用稀硫酸酸的量(mol)相当于被测样品中氨的量(mol),根据所测得的氨量即可计算样品的含氮量。 原理是因为蛋白质含氮量通常在16%左右,所以将克氏定氮法测得的含氮量乘上系数6.25,便得到该样品的蛋白质含量。

定氮法测定蛋白质的原理?

真蛋白可采用凯氏定氮法进行检测。 真蛋白是生物学上的概念,是指除去非蛋白质氮以外的蛋白态氮所计算得到的蛋白,是相对与粗蛋白而言的,一般粗蛋白质是指含氮物质的总称,而真蛋白是指纯蛋白质,可采用凯氏定氮法来测量真蛋白的含量。 凯氏定氮法的测量原理是将待测蛋白质经沸水提取并在碱性溶液中被硫酸铜沉淀,再经过滤和洗涤后,可将真蛋白质和非蛋白质含氮物分离,再用伴微量法测量沉淀物中的蛋白质含量即为真蛋白含量。 需要注意的是,粗蛋白质的测定以测量总含氮量为主,而真蛋白质的测定以测总蛋白质含量为主,真蛋白的含量对判断营养价值具有重要参考意义。

蛋白质的测定方法及其优缺点?

1、凯氏定氮法 凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。 由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。 优点:可用于所有食品的蛋白质分析中;操作相对比较简单;实验费用较低;结果准确,是一种测定蛋白质的经典方法;用改进方法(微量凯氏定氮法)可测定样品中微量的蛋白质。 缺点:凯氏定氮法只是一个氧化还原反应,把低价氮氧化并转为氨盐来测定,而不能把高价氮还原为氮盐的形式,所以不可以测出物质中所有价态的氮含量。

为什么我用凯氏定氮法测量饲料中的蛋白含量时结果总是偏高?

你可以用硫酸铵来标定含氮量是否与你测量值一致.如果仍偏高说明你在滴定终点对颜色判定有误差,如果测定一致可能是你的试验用水或氢氧化钠里含氮不纯导致.

蛋白质含量怎么计算公式?

蛋白质含量 == 蛋白质中含氮量 x6.25 ----凯氏定氮法 蛋白质的元素分析主要包括碳,氢,氧,氮,硫等,平均含氮量为16% 所以通过含氮量,除以16%(即乘以6.25),即可求出蛋白质含量。 凯氏定氮法应用有着局限性,之前的三聚氰胺问题就出在这上面:不能单纯用氮含量计算蛋白质含量

蛋白质含量怎么计算公式?

蛋白质的计算公式:c=na-18(n-m)。蛋白质是组成人体一切细胞、组织的重要成分。机体所有重要的组成部分都需要有蛋白质的参与。一般说,蛋白质约占人体全部质量的18%,最重要的还是其与生命现象有关。 细胞 (英文名:cell)并没有统一的定义,比较普遍的提法是:细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成,但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。