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itraq

时间:2023-05-12 15:08:36

itraq技术原理?

iTRAQ技术是一种新的、功能强大的可同时对四种样品进行绝对和相对定量研究的方法,这种方法是建立在iTRAQ试剂的基础上。 iTRAQ实际上是一种同位素标记试剂,包括一个带电荷的报告基团,报告基团有4种相对分子质量分别为114、115、116和117,另外还有一个肽段反应基团和一个平衡基团,平衡基团也有4种相对分子量分别为31、30、29和28。 其中平衡基团平衡分子量,保证与每一种报告基因结合后iTRAQ试剂总的相对分子量都是145,肽段反应基团可以同肽段的N末端和赖氨酸测量E氨基基团发生反应,这样可以标记生物样品中产生的所有肽段,增强任一给定蛋白的肽段覆盖度,同时保留了诸如一些蛋白的翻译后修饰的重要结构信息。

itraq和tmt标记技术的区别?

iTRAQ/TMT实验对肽段进行的是2D-LC-MS,其中第一维的色谱分析主要采用的是SCX或者高pH值的HPLC对标记好的肽段混合样品进行初步分离,而将样品分离成10个组分,以此来达到降低每个组分中肽段样品的复杂程度,然后再将这十个组分分别在进行LC-MS,以便能达到更好的质谱鉴定效果。